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LAMP技術在感染乙腦病毒致倦庫蚊混合樣本檢測中的應用
郭曉霞; 高劍; 李春曉; 邢丹; 董言德; 趙彤言 軍事科學院軍事醫學研究院微生物流行病研究所; 病原微生物生物安全國家重點實驗室; 北京市蟲媒病與自然疫源性疾病重點實驗室; 北京100071
關鍵詞：lamp 乙腦病毒 混合樣本
摘要：為建立媒介蚊蟲自然感染種群樣本攜帶病原體快速靈敏的檢測技術,本研究將實驗室經口感染乙腦病毒的致倦庫蚊陽性樣品和未感染乙腦病毒的陰性樣品按一定比例混合成混合樣本,分別采用環介導等溫擴增技術(Loop Mediated Isothermal Amplification,LAMP)和實時熒光定量聚合酶鏈反應(Real-time Fluorescent Quantitative PCR,qPCR)檢測方法,對感染乙腦病毒的致倦庫蚊混合樣本進行檢測。結果顯示:當陽性樣本在混合樣本中所占比例為0.01%時,LAMP仍然可檢測到病原體;定量PCR的最低檢出比例是陽性樣本在混合樣本中所占0.14%以上。通過進一步優化反應體系各組分的濃度、反應時間和溫度,建立了靈敏性高的LAMP擴增方法。
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