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兒童乳牙牙髓干細胞順硬度基質表面延展和向牙本質分化的潛能
關鍵詞：牙髓干細胞 牙本質 細胞遷移 細胞分化 牙本質基質蛋白1
摘要：背景:牙髓干細胞在適宜誘導條件下能夠向牙本質分化,是牙齒組織工程的重要種子細胞。然而,以往所使用的誘導劑多為化學制劑,不利于體內應用。近來有報道稱間充質干細胞能夠順材質硬度分化,這種由物理特性誘導的細胞分化研究報道較少。目的:觀察人源性乳牙牙髓干細胞在硬介質表面的延展特點及向牙本質分化潛能,為牙組織工程提供參考。方法:原代分離培養和鑒定兒童自然脫落的乳牙牙髓干細胞;使用低熔點瓊脂糖配制彈性模量為(9.12±0.94),(27.18±3.55),(59.37±4.05)和(86.45±5.33)k Pa4個梯度的固體凝膠基質,二維克隆形成實驗和劃痕實驗檢測第4代乳牙牙髓干細胞在上述硬基質表面的延展能力,Western blot方法檢測牙本質基質蛋白1、牙本質磷蛋白、牙本質涎蛋白的表達。結果與結論:當人乳牙牙髓干細胞接種于極低和低等硬度凝膠介質表面時,乳牙牙髓干細胞幾乎均以邊緣整齊的細胞克隆存在,很少見細胞平鋪和延展現象;但是當將其接種于中等和高等硬度凝膠介質表面時,乳牙牙髓干細胞克隆邊緣則表現出明顯的平鋪和延展,表現為細胞胞體變大,細胞邊緣外伸明顯。相似的現象也經細胞劃痕實驗所驗證。人源性乳牙牙髓干細胞在中等和高等彈性模量介質表面培養時,表達較高水平的牙本質基質蛋白1、牙本質磷蛋白、牙本質涎蛋白。結果表明,人源性乳牙牙髓干細胞隨著培養基質硬度的增加其延展性及成牙本質分化能力逐漸增強,為未來牙組織工程提供方法借鑒。
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