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雷公藤甲素對IgA腎病患者外周血單個核細胞炎性反應及凋亡的影響
關鍵詞：腎小球腎炎 iga 雷公藤內酯 細胞凋亡 外周血單個核細胞
摘要：目的探討IgA腎?。↖gAN）患者外周血單個核細胞（PBMC）炎性因子分泌及自身凋亡狀態，以及雷公藤甲素（TP）對其調節的相關機制。方法取IgAN患者（n=29）及健康人（／I=16）外周血，分別通過酶聯免疫吸附試驗（ELISA）和硝酸還原酶法（Griess法）檢測血漿腫瘤壞死因子儀（TNF．儀）、白細胞介素6（IL-6）和一氧化氮（No）表達情況。體外培養IgAN患者PBMC，以不同濃度TP刺激PMBC，四唑鹽比色間接法（MTY）檢測TP對細胞生長的抑制效應。根據MTF結果，分別分為IgAN患者PBMC組、植物血球凝集素（PHA，10mg／L，促細胞分裂原）模型組和PHA（10mg／L）±TP（12．5μg，L、25μg／L）處理組。ELISA法檢測上清液中TNF。儀、IL-6的分泌情況；Griess法檢測上清液中NO含量；流式細胞儀分析細胞凋亡率；RT-PCR法、Western印跡法檢測PBMC中B細胞淋巴瘤／白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相關X蛋白（Bax）、半胱天冬蛋白酶（caspase）-9、caspase-3基因和蛋白表達變化。結果IgAN患者血漿TNF-α（131．57±50．61）ng／L比（30．24±18．93）ng／L，P〈0．01]，IL-6[（76．36±25．21）ng／L比（35．08±16．59）ng／L，P〈0．01]和NO[（46．36±12．93）μmol／L比（26．61±10．87）μmol／L，P〈0．011均顯著高于健康人，PBMC凋亡率亦顯著高于健康人[（16．88±5．66）％比（8．67±3．87）％，P〈0．011。TP可抑制IgAN患者PBMC分泌TNF-α、IL-6和NO，誘導其凋亡；也可抑制Bcl-2表達，增加Bax、caspase．9、caspase-3表達。結論IgAN患者體內PBMC處于高度活化狀態，并且凋亡率增高。TP能有效抑制IgAN患者PBMC的炎性活化狀態，并可能通過線粒體途徑改變Bcl-2蛋白家族抗凋亡因子和促凋亡因子平衡而誘導IgAN患者PBMC凋亡。
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