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胰島素促進(jìn)結(jié)腸平滑肌細(xì)胞合成干細(xì)胞因子的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑
關(guān)鍵詞：胰島素 結(jié)腸 肌 平滑 干細(xì)胞因子
摘要：目的探討胰島素（Ins）促進(jìn)結(jié)腸平滑肌細(xì)胞（SMC）表達(dá)干細(xì)胞因子（SCF）的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)途徑。方法分離培養(yǎng)SD大鼠結(jié)腸SMC，采用a-actin免疫熒光鑒定。分3大組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。①Ins濃度梯度組：SMC添加不同濃度Ins（0、2．5、5、20、40和80mg／L），培養(yǎng)16h。②Ins時(shí)間梯度組：SMC＋I(xiàn)ns（40mg／L），分別培養(yǎng)0、8、16和24h。③信號(hào)通路阻斷組：SMC加LY-294002或PD-98059預(yù)處理后，再予以40mg／L的Ins誘導(dǎo)16h。四甲基偶氮唑鹽（MTT）法檢測(cè)結(jié)腸SMC增殖情況，Western印跡和反轉(zhuǎn)錄PCR檢測(cè)SCF的變化。結(jié)果①Ins在5mg／L濃度即能顯著促進(jìn)SMC增殖，其效應(yīng)與20、40和80mg／L時(shí)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P值均d0．05）。②與未添加Ins組（即空白對(duì)照組）比較，低中劑量Ins（2．5、5和20mg／L）即有促進(jìn)結(jié)腸SMC表達(dá)SCFmRNA和SCF蛋白的作用（P〈0．05），這種作用在Ins40mg／L時(shí)達(dá)到最大（P〈0．05），80mg／L時(shí)與40mg／L時(shí)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P〉0．05）。③與0h時(shí)相比，40mg／L的Ins作用于SMC8h后SCF表達(dá)增加（P〈0．05），16h后達(dá)峰值（P〈0．05），24h與16h差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P〉0．05）。④與空白對(duì)照組和溶劑對(duì)照組相比，LY-294002、PD-98059處理16h，均能減少Ins誘導(dǎo)的SCF的表達(dá)（P值均〈0．05）。結(jié)論Ins能促進(jìn)SMC增殖；在一定范圍內(nèi)呈劑量與時(shí)間依賴性誘導(dǎo)結(jié)腸SMC合成SCF，該效應(yīng)可能與PI3K與MAPK兩條信號(hào)通路有關(guān)。
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